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RNA酶的用途及破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法

閱讀:3061      發布時間:2016-5-3
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RNA酶又名核糖核酸酶,為白色凍干粉末 ,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。

RNA酶用途說明:

生化研究,測定核酸的結構

RNase 保護檢測

去除非特異結合的RNA

分析RNA 序列

水解蛋白樣品中的RNA

純化DNA

此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。

破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法

用強烈變性如鹽酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白質, 導致細胞結構破碎,核蛋白由于其二級結構的破壞而從核酸上解離下來。RNA酶可耐受多種處理等,因此可聯用上述試劑,從組織中,如富含RNA酶的胰腺中,提取完整無損的RNA。下述實驗程序系列利用RNA酶抑制劑和(或)能迅速滅活RNA酶的有關方法從組織或細胞培養物中分離總RNA、核內RNA和胞質內RNA。

RNase酶非常穩定,是導致RNA降解主要的物質。它在一些的條件可以暫時失活,但限制因素去除后又迅速復性。用常規的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑不能使所有的RNase*失活。為了獲得高質量的真核細胞mRNA,必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法,大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。

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