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LNA探針助力miRNA ISH檢測

閱讀:1250        發布時間:2022-7-26

目前針對miRNA研究,已經有很完整的體系,小優也多次的對miRNA研究的其他技術進行多次講解,本期是針對細胞水平miRNAs的定位研究--原位雜交(ISH)的介紹哦~



原位雜交技術(in situhybridization)是以標記的核酸分子為探針,在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術。



圖注:miRNA原位雜交示意圖。左側為ISH在細胞/組織水平上的步驟,右側是分子水平上的步驟。紅色和綠點代表熒光團,正方形代表非熒光配體。黑色的十字架表示miRNA的固定化。


在最早的ISH中,通常使用由DNA或RNA核苷酸組成的探針。未經修飾的DNA和RNA探針對目標序列的結合親和力相對較差,因此有人提出了一些修飾來改善它們的性質,最早也是經典的修飾就是LNA修飾,這仍然是RNA FISH的金標準。



圖注:LNA結構圖


miRCURY LNA miRNA Detection Probe為經典的LNA修飾miRNA ISH檢測探針,除此之外,對mRNA和lncRNA的檢測也有很大的幫助哦~
LNA探針已經成功的使用在多種樣本類型中(圖3),包括whole mount,單細胞,冷凍切片及FFPE組織樣本等。



miRNA detection in FFPE



miRNA detection in zebrafish.



miRNA detection in chick.


LNA探針還可以用于核酸和蛋白的共定位,熒光標記的探針與IHC同時進行,更簡單獲得鮮明的結果哦~



Dual stain in normal mammary gland by ISH and (IHC) in a double-fluorescence assay.



Dual stain in ductal carcinoma in situ (DCIS) by ISH and  (IHC) in a double-fluorescence assay.


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miRCURY LNA miRNA Detection Probe1nmoL或10nmoL不同標記的miRNA 探針339111
miRCURY LNA miRNA Detection Probe1nmoL或10nmoL不同標記的miRNA 探針339112
miRCURY LNA miRNA Custom Detection Probe1nmoL或10nmoL不同標記的定制miRNA 探針339115
miRCURY LNA miRNA Custom Detection Probe1nmoL或10nmoL不同標記的定制miRNA 探針339116
miRCURY LNA miRNA ISH Buffer Set (FFPE)2x Formamide-free miRNA ISH buffer, Proteinase K339450
miRCURY LNA miRNA ISH Optimization Kit進行miRNA ISH實驗建立條件及條件優化339451
miRCURY LNA miRNA ISH Optimization Kit進行miRNA ISH實驗建立條件及條件優化339459


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