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PI細(xì)胞周期可能有四種命運(yùn)
閱讀：1206 發(fā)布時(shí)間：2022-10-22
PI細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。細(xì)胞周期是一個(gè)重要的檢測(cè)參數(shù)，研究細(xì)胞周期變化的影響對(duì)于腫瘤的發(fā)展及藥物研發(fā)有著重要的作用。例如，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。
PI細(xì)胞周期檢測(cè)步驟：
1.細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：
收集細(xì)胞，用1ml預(yù)冷PBS洗1遍，輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞，避免細(xì)胞成團(tuán)。
2.細(xì)胞固定：
加入1ml預(yù)冷的70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4度固定2小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間(固定12-24小時(shí)可能效果更佳)。1000g離心3-5分鐘，沉淀細(xì)胞(如果細(xì)胞沉淀不充分，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間或加大離心力)。棄上清，用用1ml預(yù)冷PBS洗1遍。
3.PI染色：
每個(gè)樣品用0.5ml染色緩沖液(或PBS)重懸，加入25ulPI染色液(20×)、10ulRNaseA(50×)。37度避光溫浴30分鐘。
4.流式檢測(cè)：
用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長(zhǎng)488nm波長(zhǎng)處檢測(cè)紅色熒光，同時(shí)檢測(cè)光散射情況。采用分析軟件進(jìn)行細(xì)胞DNA含量分析和光散射分析。
PI細(xì)胞周期可能有四種命運(yùn)：
①細(xì)胞經(jīng)M期又開始第二次周期；
②停止于G2期，稱為G2期細(xì)胞(R2)，它受某種刺激后可進(jìn)入周期；
③停止在G1期，稱為休止細(xì)胞或G0期細(xì)胞，這類細(xì)胞受某種刺激后仍能進(jìn)入周期，繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂；
④喪失生命力近于死亡的細(xì)胞，稱為丟失細(xì)胞，或稱不再分裂的細(xì)胞。繼續(xù)分裂的細(xì)胞沿著細(xì)胞周期從一個(gè)有絲分裂期到下一個(gè)分裂期。不再分裂的細(xì)胞離開了細(xì)胞周期不再分裂，終死亡。