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超微量分光光度計(jì)的原理及使用方法介紹

閱讀:2010        發(fā)布時(shí)間:2023-3-6
    超微量分光光度計(jì)是一種應(yīng)用于分析和檢測微小分子濃度的儀器,主要用于分析和檢測生物分子和化學(xué)分子的含量和質(zhì)量。其工作原理基于分子吸收不同波長光線的能力,通過光線通過樣品引起的吸收程度來確定溶液的濃度。以下將詳細(xì)介紹其工作原理和使用方法。
  一、工作原理
  1.光源:超微量分光光度計(jì)使用的是可見光和紫外線的光源,普遍采用鹵素?zé)簦枠O氧化鋁、聚酰亞胺和鎢激發(fā)燈等。
  2.分光儀:分光儀通過將可見光和紫外線分解為不同的波長,根據(jù)不同波長的吸收情況來分析樣品的濃度。分光儀使用的是一組設(shè)計(jì)好的光柵來分離光線,每個(gè)光柵能夠分離一定范圍內(nèi)的波長。
  3.樣品池:樣品池是在分光儀中放置樣品的地方,通常采用石英或玻璃材質(zhì)制成。
  4.探測器:探測器是最重要的裝置之一,負(fù)責(zé)接受樣品池中吸收或透射的光,并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。探測器通常采用光電二極管或光電multiplier管。
  二、使用方法
  1.校準(zhǔn)超微量分光光度計(jì):在使用前,需要對(duì)光度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn),以確保其讀數(shù)準(zhǔn)確。校準(zhǔn)過程中,需要使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),使用前需要將樣品池清洗干凈,在樣品池中加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)溶液,設(shè)置波長,記錄吸收測量值,并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
  2.準(zhǔn)備樣品:將待測樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校瑢⑷芤悍湃霛崈舻臉悠烦刂小W⒁猓瑯悠窇?yīng)該盡可能稀釋,以提高精度。
  3.設(shè)置波長:選擇波長,將分光儀設(shè)置為樣品溶液所吸收的波長。
  4.吸收測量:將樣品池放入分光光度計(jì)中,使其測量樣品的吸收值。在吸收測量過程中,要避免任何突然的振動(dòng),以及其他外來因素的影響,如電磁干擾等。
  5.數(shù)據(jù)分析:將數(shù)據(jù)整理到工作文檔中,進(jìn)行進(jìn)一步的比較和分析。

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