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藥物對細(xì)胞周期的影響

時間:2016/8/1閱讀:2932
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藥物對細(xì)胞周期的影響

 

     藥物對細(xì)胞周期的影響可以利用流式細(xì)胞術(shù)從幾個方面進(jìn)行研究,在方法上,是相對簡單的實驗工作,然而,所涉及的原理可能是十分復(fù)制的。這方面的主要工作是研究抗腫瘤藥物對細(xì)胞的作用,以期望找出腫瘤對藥物的敏感時相、藥物對腫瘤細(xì)胞的殺傷機理等。但是,由于腫瘤細(xì)胞的生長都是不受限制的,其生長速率與正常細(xì)胞相比,有快有慢,難以一概而論。例如在某些腫瘤中,具有活性的增殖細(xì)胞占有較高的比例,比如白血病和淋巴病細(xì)胞,這樣的腫瘤生長速率較快;但多數(shù)惡性腫瘤是實體瘤,其增殖部分可能僅占一個較小的比例,因而生長速率又是相對較低的。這樣,我們在做藥物實驗時選定何種細(xì)胞進(jìn)行實驗就顯的很重要了。實驗的方法可用藥物脈沖作用或連續(xù)作用后的時間序列一維DNA直方圖或DNA與RNA二維圖(假三維圖)進(jìn)行時間序列分析。當(dāng)然,在開始實驗前要作藥物影響細(xì)胞的生長曲線,選出使藥物即不嚴(yán)重殺傷細(xì)胞,同時對細(xì)胞的生長抑制又zui明顯的劑量,至于是用體外培養(yǎng)細(xì)胞還是用活體進(jìn)行實驗,要看各方面的要求和條件來決定。

 圖是阿克拉霉素B(Aclacinomycin B)對小鼠L1210白血病細(xì)胞影響的一維DNA直方圖時間序列結(jié)果。左邊是實驗藥物組,右邊是做為對照的阿克拉霉素A組。時間順序自下而上分別為0小時,8小時、24小時、48小時、。在8小時組可見早、中S期的積累,積累的百分比可定量計算出來,但積累到48小時有所恢復(fù)。做為對照的藥物和實驗藥物半致死量是不一樣的,實驗中都選取半致死量的40%以便比較。這樣時間序列的一組圖雖然能定量地說明一些問題,但如果能夠做時間序列的DNA—RNA二維圖,會發(fā)現(xiàn)一些一維直方圖不可能發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象。

     圖中8小時、24小時阿克拉霉素B的RNA—DNA二維點圖。此組序列中值得注意的是中間一個圖。在上節(jié)中,我們曾討論過G1時相可分為GIA和GIB兩個室,GIA室的細(xì)胞只有當(dāng)RNA值超過闊值進(jìn)入GIB室后才能進(jìn)入S期。實際上,這些進(jìn)入S期的細(xì)胞在進(jìn)行DNA復(fù)制的同時,其RNA也在同步增長,這樣的同步增長的過程我們稱為正平衡生長。但在圖中24小時的那個圖上可以看到,對應(yīng)S期部分的細(xì)胞,在DNA增長的同時,其RNA值似乎有平均減少的趨勢,這樣的過程稱為負(fù)平衡增長。顯然,這樣的現(xiàn)象在單純使用直方圖時是不能發(fā)現(xiàn)的。

 用流式細(xì)胞術(shù)研究藥物影響的方法,還可以在較為復(fù)雜的模型基礎(chǔ)上進(jìn)行更復(fù)雜的實驗。當(dāng)對一些具有細(xì)胞周期特異性藥物進(jìn)行研究時,可能會發(fā)現(xiàn)特異性作用的濃度依賴性。有人曾發(fā)現(xiàn),用適宜的濃度可以使S期阻斷劑變成G2期阻斷劑。這種種復(fù)雜性都會使研究藥物對細(xì)胞周期的作用潛在著極大的困難。

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