久久国产精品午夜一区_91精品國產高清久久久久久91_?级毛片免费全部播放_欧美色图在线视频一区二区三区_国产综合亚洲一区二区三区_中文字幕熟女网_国产精品男人爽免费视频_九九无码网战_亚洲日本三级电影在线观看_欧美日韩DVD手机在线不卡

費氏弧菌發光桿菌保藏方法
（一）斜面冰箱保藏法
這是蘑菇菌種的一種短期保存法，因為它簡單易行，不需特殊設備，并能隨時觀察保藏菌種的情況，因此也是常用的菌種保藏方法。
１、保藏方法 蘑菇菌種斜面冰箱保種一般使用PDA斜面培養基即可。菌種移接后，放在22-24℃溫度下培養,要勤檢查,當菌絲健壯地長滿試管時,及時挑選無污染的培養斜面,棉塞用硫酸紙包扎后放置在4℃的冰箱中保藏。一般2-3個月轉管一次。
２、注意事項：由于斜面冰箱保藏是在4℃下進行,微生物單孢分離物活動并未停止,需要經常轉管移接,因此對于保藏所用的斜面菌種質量要求較高，其菌絲形態、菌落特征應保持原有特性，操作人員必須對斜面菌種質量應具有有一定的鑒別能力，所挑選的菌種才能適合保藏，其次菌種的菌齡不能太幼也不能太老，否則冰箱保藏后轉管擴接易造成退化。再則冰箱溫度應控制在2-4℃之間,盡量恒溫使菌絲體處于穩定的生理狀態。
（二）糞草管冰箱保藏法
１、保藏方法：糞草管的培養基是由腐熟麥稈粉100,腐熟牛糞粉25,麩皮8, 石膏粉1%,碳酸鈣2%,含水量65%左右,pH7.5制備而成,調配后裝入試管中,經高壓滅菌后,接入菌種塊,放在22-24℃溫度下培養。要勤檢查是否有污染，當菌絲健壯地長滿草基試管時，及時挑選生長正常無污染的試管，棉塞頭用硫酸紙包扎后放置在2-4 ℃的冰箱中,該保藏方法為中期保藏，一般2-3年轉管一次。
２、注意事項：由于糞草管可保藏2-3年時間,因此如何防止糞草管的水分損失是該保藏方法時間長短的關鍵所在,一方面培養基含水量不能低于62%, 另一方面棉塞用硫酸紙包扎后可加些蠟進行封口,防止水分蒸發。 再則有條件應把試管保藏在具有保濕的冰柜或冰庫中，溫度控制在2-4℃,濕度控制在90%左右。
（三）液體石蠟保藏方法
液體石蠟防止培養基水分蒸發，隔絕斜面費氏弧菌發光桿菌與 空氣接觸，抑制菌絲的單孢分離物，可能使其處于休眠狀態，推遲細胞衰老，延長菌絲的保藏，一般可保藏5-7年，是一種中長期的菌種保藏方法。
１、保藏方法：液蠟保藏蘑菇菌種的培養基為PDA斜面即可。將菌種塊移接到PDA斜面上,在22-24℃下培養15-20天,然后用液體石蠟封藏保存。液體石蠟要選化學純的，在121℃下高壓滅菌30分鐘,再將液體石蠟在160℃烘箱中加熱1-2小時。亦可將高壓滅菌后的液體石蠟放置在40-60℃溫箱中,使滅菌后的液體石蠟層出現乳白色直至變成*透明的無色為止,目的是將高壓滅菌時侵入液體石蠟中的水蒸發干凈。 將滅菌除水的液體石蠟用無菌吸管罐到長滿菌絲的斜面試管中，液體石蠟要高出斜面1.0厘米左右，然后用無毒泡沫試管塞塞好，置室溫中保藏。
２、注意事項：菌絲的培養時間不能太短，為防止菌絲體的進一步發育，可適當延長菌齡或讓試管先置在冰箱中(2-4℃)2天后再加入液體石蠟。倒入的液體石蠟要超過斜面1.0厘米左右,如過低液體石蠟揮發后會露出斜面, 從而導致斜面培養基的干涸,縮短了保藏時間。烘烤液體石蠟應乇底，盡可能把水分蒸發干凈， 防止水蒸汽蒸發導致棉花塞潮濕長霉而影響費氏弧菌發光桿菌的保藏。