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上海申知心生物科技有限公司
主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2015-5-5 閱讀(2258)
| 提 供 商 | 上海申知心生物科技有限公司 | 資料大小 | 22.5KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數 | 466次 | |
| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 2258次 |
免疫熒光組化操作流程 (石蠟切片)
1、3μm石蠟切片貼在涂有切片粘合劑的干凈載玻片上,57℃烤4-18h;
2、石蠟切片常規脫蠟至水，0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
3、抗原修復:0.02mol/L pH6.0 CB(檸檬酸鹽緩沖液),微波98℃(Ⅲ檔)15min,自然冷卻20min;0.4%胃蛋白酶消化40min,at
37℃ ；
4、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
5、加一抗PGP9.5 1:100； 37℃溫孵2h,
6、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
7、加二抗（FITC標記） 1:200室溫溫孵2h;
8、0.01mol/L pH7.3 PBS洗3min×3;
9.蒸餾水洗3min,
10、DAP-I和封片增強劑（Sigma公司）封片;-20℃保存待共聚焦觀察。
