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應對歐盟茶葉檢測新規——SFC-MS/MS分析吡咯里西啶類生物堿(PAs)

閱讀:917        發布時間:2021-7-14

 

2020年12月,歐盟發布COMMISSION REGULATION (EU) 2020/2040,修訂條例 (EC) No. 1881/2006 關于某些食品中吡咯里西啶類生物堿(Pyrrolizidine Alkaloids,以下簡稱PAs)的最高含量,正式設定PAs在食品中的*。其中對于茶葉和調味茶中的*為150μg/kg,該*計算21種吡咯里西啶類生物堿的總和。該法規將于2022年7月1日正式執行。

 

PAs是植物產生的用于抵御食草動物的一類毒素,分布廣泛。大多具有肝毒性和潛在致癌性,可以在蜂蜜、茶和草藥中找到。每種PA的毒性各不相同,對于食品制造商和食品藥品監管機構而言,準確識別和量化食品中的PAs至關重要。

 

迄今為止,已知的PA超過660種,其中許多是異構體。對于異構體PA的鑒定,與LC-MS/MS相比,SFC-MS/MS提供了更加優異的色譜選擇性。本文介紹利用SFC-MS/MS分析34種吡咯里西啶類生物堿(包括5種石松胺和2種千里光寧堿異構體)的應用案例,輕松應對歐盟茶葉檢測新規。

 

樣品前處理:茶樣品用 0.05 M 硫酸超聲提取兩次,合并提取物并用氫氧化銨調節pH值,然后進行固相萃取(具體步驟參見原文),洗脫物氮吹干燥后用1mL甲醇復溶,離心10min后取上清液待測。

 

色譜及質譜條件:參見原文。

 

  SFC-MS/MS分析34種吡咯里西啶類生物堿的典型色譜圖

  5種石松胺和2種千里光寧堿異構體基線分離色譜圖

 

利用島津SFC方法開發系統,分別考察了4種不同的手性色譜柱和8種不同的改性劑組成的色譜條件。得到的最終分析條件,可以對18種PA和16種相關N-氧化物進行定量分析。對紅茶基質樣品的分析結果表明從2到200μg/kg 范圍內線性良好,部分PA定量下限可達到0.1μg/kg。具體數據參見下表。

 

  紅茶基質中34種吡咯里西啶類生物堿的 LLOQ

 

基于本方法分析了10種市售茶葉樣品,其中4種可以檢出1種或多種吡咯里西啶生物堿。1個茶葉樣品中檢出了歐天芥菜堿、天芥菜堿、毛果天芥菜堿及其相關N-氧化物,3個茶葉樣品中檢出了石松胺、刺凌德草堿及其相關N-氧化物。

 

  本應用中使用的儀器(Nexera SFC+LCMS-8060)

 

 

參考文獻:

1,Determination of pyrrolizidine alkaloids in plant material using SFC-MS/MS, ASMS 2019, TP-221

 

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