乳制品牛乳中乳糖含量測定分析

1. 介紹

乳糖是兒童生長發育的主要營養物質之一，對青少年智力發育十分重要，特別是新生嬰兒*的，在自然界中只有哺乳類動物的奶中含有乳糖，各類植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進腦苷脂類和黏多糖類的生成，因而對幼兒智力發育非常重要。乳制品企業通常通過測定牛乳中半乳糖的含量來計算牛乳中乳糖的含量。

 

2. 實驗

設備：

ELSD3300蒸發光散射檢測器

Agilent 1260 HPLC，C.01.07

試劑及耗材：

流動相A：超純水

流動相B：色譜純乙腈

色譜柱：Beksich糖柱，4.6*250mm,5um

（貨號：Bek445101）

柱溫箱溫度：

30C

樣品：

牛乳樣品提取物

樣品預處理: 

樣品經蛋白沉淀后，0.45um濾膜過濾后取上清液待上樣

進樣體積:

20ul

按78%乙腈：22%水等梯度比例進行檢測，運行時間為20min

流動相流速：

0.9ml/min

 

樣品檢測：

樣品配置好后置于自動進樣器中，使用編輯好的方法進行自動進樣分析

3. 結果

 ELSD3300蒸發光散射檢測器測定牛乳中乳糖含量

結果見表1。

表 1：乳糖定量檢測，*個峰為半乳糖

 

表2：半乳糖和葡萄糖分離度及拖尾因子情況

 

表 3：半乳糖定量曲線

 

 R=0.99903

本次實驗的難點是樣品沒有紫外吸收，樣品水溶性強，需用乙腈稀釋，半乳糖和葡萄糖不易達到基線分離。且ELSD3300運行參數如氣體流速和檢測溫度以及增益值必須優化。

 

4. 結論

本方法使用ELSD3300測定了牛乳中半乳糖的含量，半乳糖和葡萄糖實現了基線分離，ELSD3300有平衡時間短，基線噪音小，重現性高和線性好等特點。