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QIAGEN Plasmid Kits12123質粒純化
上海優高玖全新推薦,
QIAGEN Plasmid Kits應用重力流陰離子交換柱純化轉染級質粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多10 mg的質粒DNA。離心獲得澄清的裂解產物和異丙醇沉淀。
轉染效率與質粒純化方法。
采用不同方法制備pRSVcat DNA,通過脂質體介導的轉染將其導入的細胞系內,40小時后測定CAT表達水平,確定轉染效率。每個柱形代表4個獨立的轉錄的平均值(2個質粒制備物分別轉染2次)。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉染效率。
QIAGEN Plasmid Kit實驗流程。
將中性細菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge內孵育,數秒內即可過濾澄清。然后將澄清的裂解物上樣至陰離子交換純化柱,在適當的低鹽和pH條件下,質粒DNA會選擇性地結合上去。利用中鹽濃度的洗滌液去除RNA、蛋白質、代謝物及其他低分子量雜質,使用高鹽緩沖液洗脫超純的質粒DNA。利用異丙醇沉淀對DNA進行濃縮并脫鹽,并通過離心收集。
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