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內皮細胞培養基的詳細配方

閱讀:1404發布時間:2024-10-11

內皮細胞培養基的配方通常包括基礎培養基和特定的補充成分。以下是一個常用的內皮細胞培養基配方示例:  
基礎培養基  
Dulbecco'sModifiedEagleMedium(DMEM)或RPMI1640  
選擇合適的基礎培養基,DMEM比較常用。  
補充成分  
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)  
最終濃度:10%(v/v)  
青霉素-鏈霉素溶液(Penicillin-Streptomycin)  
最終濃度:100U/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素。  
內皮生長因子(EndothelialGrowthFactor,EGF)  
最終濃度:10-20ng/mL。  
血管內皮生長因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)  
最終濃度:10-50ng/mL。  
轉化生長因子β(TransformingGrowthFactor-beta,TGF-β)  
最終濃度:1-10ng/mL(可選)。  
其他添加劑(可根據需要選擇):  
生長因子(如FGF,基本成纖維生長因子)、胰島素、氨基酸等。  
配制步驟  
準備基礎培養基:根據需要取適量的DMEM或RPMI1640。  
添加胎牛血清:加入FBS,輕輕混合均勻。  
添加抗生素:加入青霉素-鏈霉素溶液,混合均勻。  
添加生長因子:按照上述濃度分別添加EGF、VEGF、TGF-β等生長因子。  
調節pH:確保培養基的pH在7.2-7.4之間,可以使用鹽酸或氫氧化鈉進行調節。  
過濾滅菌:使用0.22μm過濾器進行滅菌,以去除微生物。  
存儲條件  
配制好的培養基應存放在4°C冰箱中,避免反復凍融,建議使用時分裝。  
請根據實驗需要調整成分及其濃度,并遵循相關的操作規程和安全指南。

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