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2023-8-16 閱讀(1374)
SF9(昆蟲卵巢細胞)細胞培養(yǎng)教程
SF9(昆蟲卵巢細胞)特點：
1.細胞靜置培養(yǎng)時半貼壁生長，也可以使用搖瓶懸浮培養(yǎng)
靜置培養(yǎng)時細胞會大量附著瓶底生長，呈半貼壁狀態(tài)，會有少部分細胞懸浮生長；
搖瓶培養(yǎng)時可以很快適應懸浮生長，呈單個或小聚團懸浮生長；
2.對溫度極為敏感
細胞于26-28℃空氣培養(yǎng)，需要盡量控制溫度，保證細胞生長狀態(tài)；
若溫度低于26℃，細胞生長速度會變慢，但恢復溫度后生長速度會逐漸恢復，不會對細胞產(chǎn)生過大傷害；
若溫度28℃-30℃，細胞生長嚴重受限；若溫度高于30℃，細胞將受不可逆?zhèn)е聼o法使用，即使溫度恢復也無法恢復正常生長狀態(tài)；
同時注意使用的培養(yǎng)基、PBS及其他試劑應復溫至室溫（最好26-28℃），盡量減少觀察細胞次數(shù)和時間；
3.細胞對吹打、氣泡等機械損傷敏感
細胞操作時若吹打力度過大、氣泡過多將嚴重影響細胞生長狀態(tài)，導致細胞后續(xù)存活率降低，注意操作輕柔；
4.細胞可以適應多種培養(yǎng)體系
該細胞多用于真核細胞蛋白表達系統(tǒng)，因此針對該細胞有諸多培養(yǎng)體系，例如Grace's Insect Medium、SF900 II、TNM-FH、ESF921等培養(yǎng)體系，包括含血清的培養(yǎng)體系和不含血清的培養(yǎng)體系，可以根據(jù)自身實驗需要選擇逐步更換為合適的培養(yǎng)體系；
5.細胞凍存存活率不高
實際實驗過程中，尚恩發(fā)現(xiàn)SF9細胞疑似表現(xiàn)出較低的凍存保存能力，凍存后活率會隨保存時間增加而逐漸下降，因此若有持續(xù)培養(yǎng)該細胞或者快速復蘇進行實驗需求的實驗室建議定期復蘇培養(yǎng)細胞并重新凍存以保證細胞凍存活性不會下降至無法接受的范圍；
6.細胞貼壁培養(yǎng)后可能會伸出觸角
細胞在貼壁培養(yǎng)時，一周左右會有部分細胞伸出較長觸角，同一個培養(yǎng)瓶培養(yǎng)時間越長，有觸角的細胞可能越多，這是細胞自然現(xiàn)象，非細胞交叉污染或狀態(tài)不佳；
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