mPAGE® Lux SDS-PAGE制膠系統介紹

時間：2024/5/6閱讀：460

相對于傳統SDS-PAGE制膠工藝，Merck公司的mPAGE® Lux制膠系統是一種更快速、簡單、安全的替代方法，可實現更具可重現性的結果。mPAGE® Lux制膠系統可在90秒內完成小型凝膠固化，而傳統方法則需要90分鐘以上。該系統采用紫外線照射快速制膠工作流程，加速mPAGE® Lux Bis-Tris試劑固化——Bis-Tris凝膠化學試劑相對于傳統方法可縮短跑膠時間。

mPAGE® Lux SDS-PAGE制膠系統

這種一步法光聚合工藝采用精密的系統控制，人為出錯的概率更低。mPAGE® 制膠器可防止滲漏，選用的Bis-Tris凝膠比人工制備的Tris-Glycine凝膠條帶質量更佳。此外，mPAGE® Lux試劑盒、mPAGE® TurboMix試劑盒和mPAGE® 預制膠均使用Bis-Tris化學試劑，共用同一跑膠緩沖液和凝膠染色劑。mPAGE® Lux制膠系統不使用APS或TEMED，有毒化學品用量更小，是一種更安全的替代方法。

傳統人工制膠工作流程

mPAGE® Lux SDS-PAGE制膠系統

mPAGE® Lux工作流程

圖1. 傳統制膠工作流程與mPAGE® Lux對比。相對于傳統制膠技術，mPAGE® Lux制膠系統總步驟更少、聚合時間更短、有毒廢棄物更少。mPAGE® Lux制膠系統制得的凝膠兼容mPAGE® 小型膠槽和Bio-Rad Mini-PROTEAN電泳槽。為實現非凡的分離度并縮短跑膠時間，請使用mPAGE® 緩沖液。Lux凝膠兼容Bis-Tris適用的緩沖液和染色試劑。

mPAGE® Lux SDS-PAGE制膠系統

圖2. mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠和手制tris-甘氨酸凝膠的數據質量對比。mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠（左）和手制tris-甘氨酸凝膠（右）的條帶質量對比。兩種凝膠都是10%丙烯酰胺，上樣A431人類細胞裂解物滴定液。電泳運行時間200V 下為 42 分鐘（Lux 凝膠），120V 下為119分鐘（tris-甘氨酸凝膠）。凝膠采用ReadyBlue™考馬斯凝膠染色劑染色。

mPAGE® Lux SDS-PAGE制膠系統

圖3. 濕法、快速和半干法轉印方法蛋白質印跡對比。對比采用12% mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠，上樣A431人細胞裂解物滴定液，通過各種轉印方法轉印到Immobilon® -P膜上。使用抗EGFR和抗ErK1/2 抗體轉印膜，然后使用Immobilon® ECL Ultra Western HRP底物進行檢測。Turbo 方法 = 使用Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™轉印系統和Trans-Blot® Turbo™轉印套裝進行轉印。