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孕酮(PROG)放免試劑盒操作方法,詳解!

時間:2019/7/17閱讀:2188
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孕酮(PROG)放免試劑盒操作方法,詳解!

 

孕酮是由卵巢黃體分泌的一種天然孕激素,在體內對雌激素激發過的子宮內膜有顯著形態學影響,為維持妊shen所必需。黃ti酮用于先兆性LIU產、習慣性LIU產等閉經或閉經原因的反應性診斷等。

 

[使用目的]
用于定量測定人血清(或血漿)中孕酮(PROG)的濃度。

 

[用途]
孕酮是一種含 21 碳原子的重要雌性激素,主要由卵巢,腎上腺和妊shen時胎盤產生。孕酮在血液循環中代謝很快,半衰期為 5 分鐘,產物為孕二醇,孕二醇在肝臟內與葡萄糖醛酸結合成水溶性的葡萄糖醛酸孕二醇,經腎臟排出,其生理作用是保證受精卵著床和維持妊shen。上孕酮的測定主要用于確定排卵,孕激素治療監測和早期妊shen狀態的評價以及在判斷黃體功能狀態方面等具有重要意義。本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含孕酮(PROG)的樣品和 125I 標記的孕酮衍生物與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二抗及PEG,使免疫復合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣本中孕酮(PROG)的濃度。

 

[實驗方法]
A B C D E F G (單 位)
0 0.3 1.1 3.5 10 20 80 ng/mL
1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復;
3、 取每個濃度的標準品、質控血清和樣本 100µl 加入相應編號的試管中;
4、 每管均各加入 200µl 標記物工作液;
5、 每管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;
6、 37℃溫育 1.0 小時;
7、 每管均各加入 1000µl 分離劑后,充分混勻;
8、 室溫放置 5~10 分鐘后,離心 3500 轉/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、 用 γ-計數器測定各管計數CPM. 檢測時間: 1 分鐘
10、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。

 

[實驗過程中應注意]
1、 γ-計數器本底計數應≤100CPM/分,效率應≥75%;
2、 加入放射性標記物時,應做好防護、小心謹慎,以避免造成放射性污染;
3、 如果某一個樣本的測定值高于zui高濃度的標準品濃度,用零標準品以 1:2 或 1:
4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結果乘以相應的稀釋倍數。

 

孕酮(PROG)放免試劑盒操作方法,詳解!

 

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