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探針法結膜支原體實時定量PCR試劑盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Conjunctivae

貨號：Mqt-con-20      規格：20個反應

貨號：Mqt-con-50      規格：50個反應

貨號：Mqt-con-100     規格：100個反應

儲存：-20度，避光保存，保質期一年。避免反復凍融。

試劑盒特點：

1，可以特異性檢測結膜支原體，與其他生物無交叉反應。

2，靈敏度高，檢測極限為反應液中4個基因組。

3，使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力強和熱穩定性好的特點；采用熱啟動方式，可抑制非特異性擴增，降低背景熒光。

4，帶有陽性對照樣品，可用于檢驗試劑盒有效性。

5，帶有UDG酶和dUTP，可降低殘留DNA的污染。

結膜支原體（Mycoplasma Conjunctivae）是綿羊、山羊、羚羊等反芻動物的傳染性角膜結膜炎（IKC）的主要病原體，在全球廣泛分布于家養的反芻類動物中。IKC是一種常見的傳染性眼病，稱為小反芻動物的紅眼病，可在家養和野生動物之間傳播，其特點是結膜和角膜的炎癥。在晚期階段，角膜變得不透明甚至穿孔，致盲的野生動物可能從懸崖墜落或死于饑餓。一項研究表明，成年綿羊中結膜支原體抗體的陽性率為53％。支原體性IKC可以在不同物種之間傳播，傳播途徑可能是物理接觸或蒼蠅等媒介昆蟲。目前在大多數國家尚不清楚結膜支原體的流行程度，這可能是由于缺乏檢測結膜支原體的技術。

結膜支原體感染的經典診斷方法是體外培養和后續對支原體菌落的免疫學鑒定。但是這個方法非常繁瑣，需要較長的時間，且需要專業化的技術。而使用PCR法檢測則具有高靈敏度和高特異性的特點，且檢測時間短，僅需幾個小時即可獲得結果。定量PCR法與普通PCR法相比，不僅可以進行定量分析，而且操作更為方便，更少受環境污染的影響。

本試劑盒選取了結膜支原體基因組內的一個膜蛋白基因進行PCR鑒定，引物經BLAST驗證為特異性靶向結膜支原體，與其他生物的基因組無交叉反應。通過檢測親緣關系較近的支原體和寄生于羊的其他微生物，本試劑盒對結膜支原體具有特異性，未見假陽性結果。對來自182只山羊、綿羊或羚羊的拭子樣本進行檢測，本試劑盒檢測靈敏度明顯優于平行檢測的巢式PCR法。

本試劑盒包含熱啟動DNA聚合酶、dNTP（以dUTP代替dTTP）、引物、探針、陽性對照品、ROX染料，和用以防止殘余DNA污染的UDG（Uracil-?DNA?Glycosylase，尿嘧啶-DNA-糖基酶），用戶只需準備好DNA樣品即可使用。

本試劑盒采用的DNA聚合酶源自極-端嗜熱菌（Thermus thermophilus），經改造后較普通的Taq酶具有更強的抗抑制能力和熱穩定性。通過結合特異性單克隆抗體，在室溫下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循環的熱變性階段，抗體受熱被去除，此時DNA聚合酶活性恢復，因此獲得“熱啟動"功能。熱啟動可減少殘余DNA的污染，提高PCR擴增效率、靈敏度和目的片段產量。

本產品僅供研究使用。

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