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116次-L-蘋果酸酶法分析試劑盒
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更新時間:2025-01-22 08:47:46

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L-蘋果酸是檸檬酸循環的組分之一,在所有有機體中都存在。定量檢測L-蘋果酸在葡萄酒、啤酒、面包、果蔬產品及化妝品和藥品的生產中很重要。L-蘋果酸是Z重要的果酸之一。在葡萄酒生產業,L-蘋果酸和L-乳酸是蘋果乳酸發酵中兩項非常重要的監測指標。在很多時候如在低熱量飲料生產中L-蘋果酸經常用作防腐劑和增香混合物。

原理:

測定L-蘋果酸需要進行兩步酶促反應,*步:在L-蘋果酸脫氫酶(L-MDH)的催化作用下,L-蘋果酸被煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)氧化生成草酰乙酸

第二步:為了使反應(1)*進行,需要進行第二步反應,在超量的L-谷氨酸的存在下,由谷氨酸草酰乙酸轉氨酶催化,草酰乙酸和L-谷氨酸生成L-天冬氨酸2–酮戊二酸

生成的NADH的量取決于L-蘋果酸的量,NADH的量可根據340nm下吸光度值的增加測定。

特異性, 靈敏度, 測量范圍和精確度:

該實驗方法是專門測定L-蘋果酸含量,D-蘋果酸,L-乳酸,L-天冬氨酸和延胡索酸不反應。

檢測中zui小吸光光度差異0.005個吸光度單位,這相當于zui大樣品體積為2.00 mLL-蘋果酸濃度為0.12 mg/L(或相當于樣品體積為0.10 mL時,濃度為2.49 mg/L)。檢測限為0.25 mg/L,這是在zui小吸光光度差異為0.010吸光光度單位,zui大樣品體積為2.00 mL得到的。

該實驗的線性檢測范圍為0.5-30ug L-蘋果酸。同一樣品進行重復測定,吸光度值可能會產生 0.005-0.010吸光度單位的差異。當樣品體積為0.10 mL,這相當于L-蘋果酸濃度大約在2.49-4.98 mg/L之間。如果樣品是經過稀釋的,在計算結果時候需要乘以相應的稀釋系數(F,如果在樣品制備階段,樣品被稱重,如:10g/L,可能會產生0.02-0.05g/100g的差異。

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