15026555973
當前位置：上海谷研實業有限公司>>技術文章>>AtT-20小鼠垂體瘤細胞培養方法
AtT-20小鼠垂體瘤細胞培養方法
在成功復蘇并傳代培養Att-20細胞后，需重點關注其生長狀態和培養環境的穩定性。Att-20細胞貼壁生長，通常呈多邊形或梭形，若觀察到細胞形態異常或大量懸浮死亡，需排查培養基成分、血清質量或污染問題。
培養條件優化
1. 培養基選擇：高糖DMEM（含10%胎牛血清）是常用基礎培養基，但可嘗試添加1%非必需氨基酸（NEAA）或2mM L-谷氨酰胺以促進增殖。
2. 傳代操作：細胞密度達80%-90%時需傳代，使用0.25%胰酶（含EDTA）消化1-2分鐘，輕柔吹打避免成團。離心后按1:3至1:4比例接種至新培養瓶。
3. 凍存要點：凍存液需含10% DMSO和90%血清，程序降溫后液氮保存，避免反復凍融。
常見問題解決
- 生長緩慢：檢查血清批次活性或補充5 ng/mL bFGF（堿性成纖維細胞生長因子）。
- 聚集成團：縮短消化時間或改用低濃度胰酶（0.05%）。
- 支原體污染：定期PCR檢測，必要時使用抗生素如Plasmocin處理。
應用提示
Att-20細胞常用于激素分泌研究（如ACTH），實驗前需確保細胞狀態穩定，建議同步設置空白對照組。通過優化培養細節，可顯著提高實驗重復性與數據可靠性。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
