蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：內皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

EL; EDL; Endothelial Lipase; Endothelial cell-derived lipase

型號：GOY-01D210

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：Secreted

預測分子量：34.6kDa

實際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Gly203~Lys471 (Accession # Q8VBX1) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：9.2

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Procollagen C Proteinase Enhancer 2 (PCPE2)  產品名稱：前膠原C端增強子2(PCPE2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5)  產品名稱：過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Corin (CRN)  產品名稱：Corin蛋白(CRN)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant D-Aspartate Oxidase (DDO)  產品名稱：D-天冬氧化酶(DDO)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Acetylcholinesterase (ACHE)  產品名稱：乙酰酯酶(ACHE)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1)  產品名稱：周期素依賴性激酶1(CDK1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

卷曲螺旋結構域蛋白107抗體 CCDC107

卷曲螺旋結構域蛋白129抗體 CCDC129

卷曲螺旋結構域蛋白18抗體 CCDC18

卷曲螺旋結構域蛋白56抗體 CCDC56

卷曲螺旋結構域蛋白116抗體 CCDC116

卷曲螺旋結構域蛋白117抗體 CCDC117

卷曲螺旋結構域蛋白127抗體 CCDC127

卷曲螺旋結構域蛋白138抗體 CCDC138

轉錄同源蛋白質CUX2抗體 Cux2

卷曲螺旋結構域蛋白146抗體 CCDC146

卷曲螺旋結構域蛋白144NL抗體 CCDC144NL

卷曲螺旋結構域蛋白147抗體 CCDC147

內皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白大鼠斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

L-Glutamine大鼠小腸血管內皮細胞培養基

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusMN-s, 小鼠紋狀體神經元

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae微桿菌屬 Microbacterium sp.

猴菌 Hericium erinaceusImproved-Lowry蛋白定量試劑盒

總狀共霉 Syncephalastrum racemosum大鼠肝實質細胞培養基

青色小四孢菌生孢梭菌 Clostridium sporogenes

人羊膜細胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠腸靜脈內皮細胞培養基SW-13(人腎上腺皮質細胞)

桿菌屬 Lactobacillus sp.釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

刺孢小殼銀漢霉 Cunninghamella echinuata大鼠卵巢成纖維細胞培養基

人食管上皮細胞培養基B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞)

洋蔥假單胞菌 Pseudomonas cepacia釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae