蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)

CD284; TOLL; HToll

型號：GOY-01D315

信號轉導

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

肺臟病學

物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Serine/Threonine Kinase 39 (STK39)  產品名稱：/激酶39(STK39)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10)  產品名稱：非ATP酶體26S亞基10(PSMD10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)  產品名稱：耦合因子6(CF6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)  產品名稱：耦合因子6(CF6)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Aldehyde Oxidase 1 (AOX1)  產品名稱：乙醛氧化酶1(AOX1)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)  產品名稱：鈉/鉀離子轉運ATP酶β4肽(ATP1b4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

聚合酶3抗體 CSGLCAT

β1/β-1,4-GalNAc-T抗體 CSGALNACT1

胎盤催乳素1/2抗體 Placental lactogen I+II

激酶C-SRC抗體 CSK

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酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體 CSNK1A1L

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磺基轉移酶CSPS抗體 CSPS

軟骨酸性蛋白1抗體 CRTAC1

富含半蛋白結合蛋白抗體 CSRP2BP

富含半蛋白2抗體 CSRP2

CREB調節轉錄激活因子3抗體 CRTC3

Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白牛人腺上皮細胞培養基100mL

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis人氣管平滑肌細胞培養基

木糖氧化產堿桿菌 Alcaligenes xylosoxidansEA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis人胰島β細胞培養基

INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes香菇 Lentinula edodes

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

K562/慢性髓性白血病細胞Stripping Buffer/蛋白印跡膜再生液

雙孢蘑菇MDA-MB-453(人腺細胞)

球毛殼 Chaetomium globosum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

人肝內膽管上皮細胞培養基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae