蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶(hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)

PFK1; PFKX; Phosphofructokinase 1; Phosphofructo-1-kinase isozyme A; 6-Phosphofructokinase Polypeptide X; Fructose-6-Phosphate 1-Phosphotransferase

型號(hào)：GOY-01D724

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：46.3kDa

實(shí)際分子量：46kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Thr2~His390 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：6.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱(chēng)：天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Legumain (LGMN)

產(chǎn)品名稱(chēng)：賴(lài)氨酰氧化酶(LOX)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Lysyl Oxidase (LOX)

產(chǎn)品名稱(chēng)：賴(lài)氨酰氧化酶(LOX)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱(chēng)：Recombinant Lysyl Oxidase (LOX)

產(chǎn)品名稱(chēng)：牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Vaccinia Related Kinase 1 (VRK1)

產(chǎn)品名稱(chēng)：脫氫酶(XDH)重組蛋白  物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)  英文名稱(chēng)：Recombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 Kidins220

賴(lài)tRNA的連接酶抗體 Lysyl tRNA synthetase

磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 phospho-Kidins220 (Ser918)

基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 KRV-VP1 + KRV-VP2 (C-terminus)

鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體 KCNQ1

組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 KMT1A

生物鐘KAT13D蛋白抗體 KAT13D

Kelch樣蛋白36抗體 KLHL36

磷酸化離子通道蛋白Kv1.3抗體 phospho-KCNA3(Tyr135)

鉀離子通道蛋白家族成員4抗體 KCNE4

鉀氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白KCC4抗體 KCC4

電壓門(mén)控性鉀通道蛋白亞基kv5.1抗體 KCNF1

肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)重組蛋白人人高分化胃細(xì)胞英文名稱(chēng)：NCI-N87

滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Taxilin Alpha (TXLNa)

人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

白介素8(IL8)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Interleukin 8 (IL8)

TAT肉湯/胰蛋白胨大豆聚山梨酸酯/大豆聚山梨酸酯/胰酪胨大豆聚山梨酸酯/TAT Broth化妝品和藥品中微生物檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

卵黃多粘菌素基礎(chǔ)MYP 規(guī)格： 250g 用途： 用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...

糖-明膠培養(yǎng)基/Lactose-Gelatin Medium產(chǎn)氣莢膜梭菌明膠液化試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)

小鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL