蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial (CA5B)

CA-VB; CAVB; Carbonate dehydratase VB

型號：GOY-01D1144

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：20.1kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg63~Pro225 (Accession # Q9QZA0) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：假尿苷酸合酶1(PUS1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Pseudouridylate Synthase 1 (PUS1)

產(chǎn)品名稱：脫氧輔蛋白合酶(DHPS)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Deoxyhypusine Synthase (DHPS)

產(chǎn)品名稱：脫氧輔蛋白合酶(DHPS)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Deoxyhypusine Synthase (DHPS)

產(chǎn)品名稱：核苷磷酸化酶1(UPP1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Uridine Phosphorylase 1 (UPP1)

產(chǎn)品名稱：細(xì)胞色素P450 17A1(CYP17A1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Cytochrome P450 17A1 (CYP17A1)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化Ras特異性核苷酸釋放因子1 Phospho-RASGRF1 (Ser916)

磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 Phospho-RSK3 (Thr356 + Ser360)

磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 Phospho-RSK2 (Ser227)

磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 Phospho-RSK2(Tyr529)

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf (Ser259)

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser296)

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser338)

磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 Phospho-Rb (Ser807 + Ser811)

mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 Raptor

磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 Phospho-Raptor (Ser792)

磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 Phospho-Rb (Thr821)

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf (Ser289)

碳酸酐酶ⅤB(CA5B)重組蛋白小鼠大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

磁力攪拌子15mm只

Coomassie brilliant blue R-250 考馬斯亮藍(lán)R-25010g瓶

Indole-3-butyric acid potassium salt 吲哚丁酸鉀（IBA-K)5g瓶

結(jié)晶紫染色液(1%)500ml瓶

ConA Sepharose 4B ConA-糖凝膠 4B25mL瓶

UTP.Na3 尿苷-5'-三磷酸三鈉250mg瓶

Methimazole -甲硫噻唑60-56-0100mg

通用基因組100T盒

96孔血凝板96孔塊

Lipopolysaaah aricles 脂多糖10mg支

Magnoflorine iodide 碘化木蘭花堿4277-43-410mg

Thionine acetate 硫堇1g瓶