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人骨肉瘤細(xì)胞；SW 1353*操作步驟：

1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。

3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。

7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。

10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

人骨肉瘤細(xì)胞；SW 1353*現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。

細(xì)胞名稱 人骨肉瘤細(xì)胞；SW 1353*

形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性  SW 1353細(xì)胞zui初從一位72歲女性白人的右肱骨原發(fā)性II級(jí)骨肉瘤中得到。 zui初的培養(yǎng)基是含有和胰島素的L-15添加10%FBS和抗生素。 1982年１月ATCC收到１支傳代至12代的凍存管。

培養(yǎng)條件  L15: Leibovitz Medium  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況 P(25+5)

凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè) 陰性

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

人骨肉瘤細(xì)胞；SW 1353*運(yùn)輸保存：

采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

用途：只可用于科研。

儲(chǔ)存：液氮。

運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。

細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。

130420-1    Protein G 瓊脂糖    1mL

130850-1    Protein G 磁珠    1mL

131201-2    Protein A+G 瓊脂糖    2mL

130418-1    Protein A 瓊脂糖    1mL

130849-1    Protein A 磁珠    1mL

19-0190-100    PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )    100mL

19-0180-100    PRMI1640 培養(yǎng)基    100mL

130876-100    PreScissiom 蛋白酶    100U

130620-60    Poly(U) 聚合酶    60U

131133-250    Poly(I).Poly(C)    250mg

120509-20    Poly(A) 聚合酶    20U

131132-100    Poly r(A)    100mg

131116-1    pNPP 干粉    1g

100833-5    PMSF 溶液，10mg/mL    5mL

23-0620-1    PMA/TPA (PKC 激活劑 )    1mg

131290-250    PLPD 固定液    250 mL

131289-250    PLP 固定液    250 mL

23-0610-5    Pifithrin-a(p53 抑制劑 )    5mg

130429-250    Phusion DNA 聚合酶    250U

23-0600-1    Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 )     1mg

51207-100    Pfu DNA 聚合酶    100U

131292-250    PFG 固定液    250 mL

131134-100    Percoll    100mL

23-0590-1    PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )    1g

23-0580-2    PD 98059(MAPKK 抑制劑 )    2mg