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腫瘤細胞凍存保護劑

時間:2017/6/20閱讀:922
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腫瘤細胞很多化合物都可以作為凍存保護劑,它們既可以單獨使用也可以聯合使用,例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有的準則,但是大家普遍認為二甲基亞砜(DMSO)和甘油是保護活細胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護劑。其他凍存保護劑可根據情況使用,可單獨使用也可聯合使用,包括:聚乙烯乙二醇(polyethylene glycol),丙烯乙二醇(propylene  glycol),甘油(glycerine),聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone),山梨醇(sorbitol),右旋糖苷(dextran),海藻糖(trehalose)。
凍存組織和整個器官的需求,促進了凍存方法的發展,新方法也提高了凍存腫瘤細胞和有機體的復蘇。這些方法包括改變凍存保護劑的濃度和加入添加劑,避免凍存過程引發的細胞調亡或 程序性死亡。多年來人們一直認為,是凍存過程中產生的細胞內物理變化或損壞,造成凍存后細胞的死亡。而zui近有研究發現,一些更為精細的胞內活動可能導致了細胞死亡,而這些活動可在一定程度上受控于適當的凍存添加劑。
凍存過程中,凍存保護劑有多種功能。例如,DMSO 可以降低冰點,促進細胞在胞內冰晶形成之前脫水更加*。普遍認為,當凍存保護劑可有效穿透細胞,延遲胞內冰晶形成,降低溶液效應時,凍存保護的效果*。另外,需要根據凍存的細胞類型來選擇凍存保護劑。對絕大多數細胞來說,甘油是更好的選擇,因為它的毒性比DMSO 小。但是,DMSO 具有更好的滲透性, 通常作為較大型較復雜的細胞凍存,如原生生物。在添加到細胞懸液之前,凍存保護劑應該用新鮮培養基稀釋到適宜濃度,這能zui小化潛在的化學反應損害,并確保腫瘤細胞能均一接觸到保護劑,減少毒害效應。DMSO 和甘油通常使用的濃度范圍為 5-10%(v/ v)。除了用于植物細胞,二者一般不聯合使用。

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