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原代細胞分選的步驟

時間:2018/2/24閱讀:1222
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原代細胞當經熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動室內。流動室內充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動下,細胞被排成單列,以一定速度從流動室噴口噴出。在流動室的噴口上配有一個超高頻的壓電晶體,充電后振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷,當液滴流經過帶有幾千伏的偏轉板時,在高壓電場的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,沒有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實現細胞的分離。

流式細胞分選的特點

1. 少量細胞分選時,流式細胞分選度高(99%以上),速度快。目前,先進的流式細胞儀的分選速度可達25 000個細胞/秒以上,比傳統的分選速度提高了很多倍,原來需要一天的工作現在只需要幾小時就能完成。不過流式細胞儀分離細胞的量還是有一定的限制,一次分離的zui大合理量約為108個細胞。如果細胞量超過109個,則需要耗費10小時以上,分選后細胞的活力會受到很大的影響。

2. 可以同時進行多個Marker分選,正選負選同時進行。以前的流式細胞儀只能給液滴充上正電荷或負電荷,因此在電場中只能向左或向右偏轉,即兩路分選。現在的儀器可以給液滴充以不同的電量,從而調整液滴的偏轉角度,實現多路分選。BD的FACSAria流式細胞儀就可以進行四路分選。

3. 不僅于表面抗原,流式細胞儀可以根據任何能檢測到的發光度(如細胞體積)或熒光(如DNA、RNA或蛋白含量,酶活性,特異抗原)散射度差異來分離細胞。如果能保證流式細胞儀的無菌狀態,那么分選后的細胞還可以進行培養或其他分析。

4. 如果原代細胞只是偶爾做幾次細胞分選的話,用流式分選還是比較劃算的,只需要準備樣品和抗體,交納一定的儀器使用費即可,不需要購買配套的設備。
60-32-2    Aminocaproic Acid    氨基己酸標準品    200mg
125-84-8    Aminoglutethimide    氨魯米特標準品    200mg
61-78-9    Aminohippuric Acid    氨馬尿酸標準品    200mg
19774-82-4    Amiodarone Hydrochloride    鹽酸胺碘酮標準品    200mg
33089-61-1    Amitraz    雙甲瞇標準品    200mg
549-18-8    Amitriptyline Hydrochloride    鹽酸阿米替林標準品    200mg
12125-02-9    Ammonium Chloride    氯化銨標準品    200mg
57-43-2    Amobarbital CII    異戊巴比妥CII標準品    200mg
14028-44-5    Amoxapine    阿莫沙平標準品    200mg
原代細胞

 

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