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微生物法測定泛酸的方法步驟

閱讀:2382      發布時間:2018-5-18
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泛酸是輔酶ACoA)和酰基載體蛋白(ACP)生物合成的重要前體物質,參與人體中類固醇、褪黑激素、抗體和亞鐵血紅素的合成,是維持生命正常生理機能的必需小分子有機物,也是嬰幼兒乳粉中重要的營養物質。

 

目前的兩種方法——微生物法和液相色譜法都可以用于檢測奶粉等嬰幼兒食品中的泛酸,結果具有可比性。微生物法法測定泛酸含量靈敏度高,其標準曲線相關系數、回收率和相對標準偏差方面,檢測結果都較好。而液相色譜法檢測速度較慢、成本較高,所以采用微生物法進行大量樣本的測定,被美國AOAC所推薦,也是我國國家標準檢驗方法的仲裁法。

 

該方法操作步驟較多,微生物生長的不確定性強也會影響結果。注意這些可能存在的影響因素,可以保證測量結果的穩定和準確。有人研究發現,泛酸檢驗結果影響zui大的是試樣前處理(存在泛酸損失)及稀釋(包括容量瓶、吸量管、量筒等玻璃器具的校準和室溫對液體體積的影響,其次是標準溶液的配制。另一項研究則發現,是微生物因素引起的吸光度曲線偏離線性影響zui大,因此建議在日常監測中,減少微生物培養環境因素的波動,對培養環境實時更嚴格的控制。

 

關于微生物法測泛酸的精密度,有人對14個嬰兒配方奶粉的泛酸含量進行了測定,進行了28次相對誤差和20次回收率的觀察,發現75%的結果相對誤差都<10%,回收率有80%在90~110%之間,說明該方法用于檢測奶基嬰幼兒食品是可行的。

又有研究發現,標準曲線在0~50ng/ml范圍內,線性關系較好。同時提出幾點注意事項,要注意無菌操作;避免菌種污染;玻璃器皿要嚴格清洗;必要的話,樣本多做幾個稀釋度的實驗;降溫過程中,要將試管浸入冷水中,使其迅速降溫,避免沉淀和顏色產生;用軟件擬合4次泛酸標準曲線。

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