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超氧陰離子清除能力測試盒

2021-5-7  閱讀(1187)

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測定意義:超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理:AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

需要的儀器,耗材:天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

樣品處理
1. 組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL 提取液) 加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。

2. 細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加 入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然 后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。

3. 培養液或其它液體:直接檢測。

4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如 1mg/mL。 

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