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測定意義:線粒體復合體Ⅲ(EC1.10.2.2)又稱CoQ-細胞色素C還原酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體中,是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分,負責把還原型CoQ的氫傳遞給細胞色素C,生成還原型細胞色素C。測定原理:與氧化型細胞色素C不同,還原型細胞色素C在550nm有特征光吸收,因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體復合體Ⅲ酶活性。需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。樣本處理1、
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土壤脲酶(UE)測試盒操作程序測定意義:S-UE能夠水解尿素,產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和*氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。測定原理:利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH3-N。需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。土壤脲酶(UE)測試盒操作程序樣本處理新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩。
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測定意義:SOD(EC1.15.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化超氧化物陰離子發生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統中具有重要作用。測定原理:通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-.),O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-.,從而抑制了甲臜的形成;反應液藍色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心
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測定意義:GSH/GSSG是細胞內重要的氧化還原對之一。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態,也是谷胱甘肽氧化還原循環的主要指標之一。測定原理:利用2-VP法測GSSG含量。需要的儀器,耗材:低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。樣本處理(1)組織處理新鮮組織首先用PBS沖洗2次,然后稱取動物組織或者植物組織0.1g。加入用試劑一潤洗過的勻漿器中(勻漿器提前放冰上預冷);然后加入
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測定意義:GSH/GSSG是細胞內重要的氧化還原對之一。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態,也是谷胱甘肽氧化還原循環的主要指標之一。測定原理:利用2-VP法測GSSG含量。需要的儀器,耗材:低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。樣本處理(1)組織處理新鮮組織首先用PBS沖洗2次,然后稱取動物組織或者植物組織0.1g。加入用試劑一潤洗過的勻漿器中(勻漿器提前放冰上預冷);然后加入
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生化檢測可以檢測的樣本類型的:體液:血清(漿)、尿液、唾液等組織:動植物組織食品:果汁、蜂蜜、牛奶、紅酒、巧克力等其它:保健品、化妝品測定意義:S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類,在H2O2清除系統中具有重要作用。測定原理:H2O2在240nm下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應S-CAT活性的高低。試驗中所需的儀器和試劑:紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。樣本處理新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩
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測定意義:蔗糖轉化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據適pH,Ivr分為酸性轉化酶(AI)和中性轉化酶(NI)兩種類型。AI的適pH為3~5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AI(B-AI)兩種類型。S-AI主要存在于細胞液泡或自由空間中,適pH為4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗糖,調節液泡中蔗糖的利用和果實內糖類的積累。測定原理:S-AI催化蔗糖降解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基
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兔胰淀素ELISA試劑盒實驗方法樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果