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簡析人正常組織來源細胞傳代的幾種技術方法

閱讀:255          發布時間:2017-10-9

人正常組織來源細胞是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。

一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。

那么關于原代細胞的傳代培養,我們應該怎么做呢?

一、貼壁細胞的消化法傳代

1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。

2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。

3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時,棄去消化液,加入培養液終止消化。

4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,分別接種到另外兩到三個培養瓶中,置37℃培養箱中繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。

二、懸浮細胞的傳代

1、直接傳代

① 讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3。

② 用吸管吹打形成細胞懸液后,分別接種到另外兩到三個培養瓶中,置37℃培養箱中培養。

2、離心法傳代

① 將細胞連同培養液一并轉移到離心管內,離心800-1000rpm,5分鐘。

② 去除上清,加新的培養液到離心管內,用吸管吹打使之形成細胞懸液。

人正常組織來源細胞將細胞懸液分別接種到另外兩到三個培養瓶中,置37℃培養箱中培養。
53-39-4     氧雄龍標準品    Oxandrolone CIII    50mg
53-36-1     甲潑尼龍醋酸酯標準品    Methylprednisolone Acetate     200mg
5333-42-6     辛基十二烷醇標準品    Octyldodecanol     200mg
532-76-3     鹽酸海克卡因標準品    Hexylcaine Hydrochloride    1g
532-32-1     苯甲酸鈉標準品    Sodium Benzoate     1g
532-03-6     美索巴莫標準品    Methocarbamol     200mg
53-19-0     米托擔標準品    Mitotane    500mg
53-16-7    雌酚酮標準品    Estrone    200mg
530-43-8    氯霉素A多晶型標準品        100mg
530-43-8    無味氯霉素A晶型標準品        200mg
530-43-8    氯霉素棕櫚酸酯標準品    Chloramphenicol Palmitate    200mg
人正常組織來源細胞

 

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