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樹脂包埋透射電鏡
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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 上海
更新時間: 2025-06-11 09:49:27
期: 2025年6月11日--2025年12月12日
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產(chǎn)品簡介

樹脂包埋透射電鏡,樹脂包埋實驗步驟:1、取材:電鏡取材非常嚴(yán)格,取材過程中速度要快,5分鐘內(nèi)要將組織取出放入固定液中;取材組織塊要小,一般要求將組織切成1立方毫米大小;取材部位要準(zhǔn)確、取材溫度要低是在4℃條件下進行;取材工具要干凈,鋒利。如果是貼壁細胞不可用酶消化下來,先吸去培養(yǎng)液然后加入電鏡固定液用橡膠塊刮下細胞,離心,細胞體積保證綠豆大小即可,然后吸去上清更換固定液繼續(xù)固定。

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樹脂包埋透射電鏡

樹脂包埋透射電鏡樹脂包埋實驗步驟:1、取材:電鏡取材非常嚴(yán)格,取材過程中速度要快,5分鐘內(nèi)要將組織取出放入固定液中;取材組織塊要小,一般要求將組織切成1立方毫米大小;取材部位要準(zhǔn)確、取材溫度要低是在4℃條件下進行;取材工具要干凈,鋒利。如果是貼壁細胞不可用酶消化下來,先吸去培養(yǎng)液然后加入電鏡固定液用橡膠塊刮下細胞,離心,細胞體積保證綠豆大小即可,然后吸去上清更換固定液繼續(xù)固定。2、固定:取材后要及時固定,組織、細胞、蛋白等固定選用2.5%中性戊二醛固定液,植物等標(biāo)本則需要選用多聚甲醛和戊二醛的混合固定液。室溫固定兩小時左右后,放入4℃保存運輸(如果是植物或者肺組織,則需要進行真空抽氣固定,一般需要抽氣固定24小時左右,直至標(biāo)本*沉入容器底部)。3、鋨酸后固定:將標(biāo)本從固定液中取出,用0.1mol/L的PB清洗并過夜,第二天轉(zhuǎn)入1%鋨酸后固定,固定時間普通標(biāo)本2h左右,植物標(biāo)本8至12h左右。3、脫水:鋨酸固定后的標(biāo)本用用0.1mol/L的PB清洗后使用梯度乙醇脫水,濃度依次是50%、70%、80%、90%、95%、*,植物標(biāo)本則會在50%乙醇前面再增加一個30%乙醇梯度,脫水時間普通標(biāo)本為10~15min,植物標(biāo)本脫水時間為1~1.5h4、浸透:用丙酮作為乙醇和樹脂間的過度溶劑,從純丙酮開始,中間經(jīng)過丙酮和樹脂的混合劑,混合比例丙酮從高到低到純樹脂,整個浸透過程需要1~2天完成。5、包埋:先將組織對應(yīng)的標(biāo)簽放包埋板中,然后加入樹脂,再將浸透好的樣本放入包埋板中,調(diào)整好包埋面,然后放入恒溫箱內(nèi)熟化,熟化過程需要2~3天。熟化完成后,樣本樹脂包埋完成。

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