改良O157顯色培養基使用說明書

組分

科瑪嘉O157顯色培養基一瓶，添加劑A和B各一支。

瓊脂 15.0 g/L   蛋白胨和酵母粉 13.0 g/L   色素1.2 g/L

pH值 6.9±0.2℃

操 作
1、取瓶內干粉29.2g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中，充分攪拌混勻。也可根據需要按照29.2 g/L的比例擴大或縮小制備培養基的量。

2、加熱至100℃，不停攪拌，使其*溶解。切勿加熱超過100℃，切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱，應將培養基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變為大氣泡，直至*溶解即可。切勿使培養基溢出。
3、加熱后的培養基冷卻至45℃~50℃，輕輕地搖動均勻，傾注平皿，使其凝固，晾干備用。

對于污染較為嚴重的樣品，使用添加劑可增強CHROMagar O157顯色培養基的選擇性：

        在添加劑A中加入1ml無菌水，在添加劑B中加入1ml 95%乙醇，輕輕搖動或放置于37℃水浴中，待內容物全部溶解方可使用。然后以無菌操作分別加入到冷卻至45℃~50℃的培養基中，輕輕混勻。（添加劑A、B各1ml，用于1000ml培養基，可按比例放大或縮小，剩余的添加劑可以保存在-20℃冰箱中，有效期為半年）。

保存  該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內貯存2周（2℃~8℃，避光）。

接種

      劃線或涂布接種（冰箱內保存的平板使用前應恢復至室溫），在36

±1℃恒溫條件下有氧培養18-24h。

結果

性能及局限

    大腸桿菌O157靈敏度為98%（Bettelheim et al. 1998）。但缺乏亞碲酸鉀時，各種非大腸桿菌O157菌株可以出現相同顏色的菌落（如沙門氏菌）。建議通過乳膠試驗驗證可疑菌落。大腸桿菌O157的鑒定需要做血清學實驗。

貯存條件

干粉需保存于15℃~30℃干燥環境中，在有效期前使用。

污染處理

使用過的培養基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關規定丟棄。

附：供體外診斷使用，產品須專業人員操作。