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在細胞培養(yǎng)中遇到培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦

閱讀:3592        發(fā)布時間:2019/8/22
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    細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)看重的就是無菌操作,無菌操作是細胞培養(yǎng)是否成功的關鍵點。凡是放入超凈臺中的不是一次性使用的物品事先都需要經過高壓滅菌;不能進行高壓處理的物品也需要經過75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器、試管架、培養(yǎng)皿、廢液缸等。

培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦?

可能造成的原因:

1.CO2張力不對;

2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊;

3.NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足;

4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確;

5.細菌、酵母或真菌污染。

解決方法:

1.按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內CO2濃度,2.0g/L3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液

2.松開瓶蓋1/4

3.HEPES緩沖液至1025mM終濃度

4.CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Hanks鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks鹽配制的培養(yǎng)液

5.丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌

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