瓊脂糖凝膠電泳

脂糖凝膠電泳原理

脂糖凝膠電泳的分析原理與其他支持物電泳最主要區(qū)別是：它兼有“分子篩"和“電泳"的雙重作用。

瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過(guò)時(shí)會(huì)受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動(dòng)時(shí)受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。現(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中。核酸會(huì)根據(jù)pH不同帶有不同電荷，在電場(chǎng)中受力大小不同，因此跑的速度不同，根據(jù)這個(gè)原理可將其分開(kāi)。

實(shí)驗(yàn)步驟

1.制膠：使用電泳緩沖液在制膠器上配制1.0%的瓊脂糖凝膠

2.混樣：2μL載樣緩沖液、 2μL 核酸熒光染料，10μLPCR產(chǎn)物混勻

3.點(diǎn)樣：將上步混好的樣10 μL加到凝膠孔中

4.電泳：90V電壓下電泳10~20min

結(jié)果展示

實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1. 實(shí)驗(yàn)周期：1-2周

2. 交付標(biāo)準(zhǔn)：引物序列、電泳圖、原始膠片、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器）

需確認(rèn)信息

1、目的基因ID號(hào)及種屬

2、樣本類(lèi)型（組織or細(xì)胞等）

3、樣本數(shù)量