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DH5a感受態細胞
產品名稱：DH5a Chemically Competent Cell
產品編碼: G6016
保存條件: -80°C
貨號、數量、規格: G6016-20 (20支100u1)、G6016-100 ( 100支100u1)|
pUC19 ( control vector) 10pg/ μ 1; 10μ 1
基因型
F-φ80 lac Z△M15△(lacZYA-arg F) U169 endAl recAl
hsdR17 (rk- , mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA
操作說明|
1. CLBio DH5a感受態細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態時迅速插入冰中)，加入目的DNA (質粒或連接產物)并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42°C水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700 μ 1不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB)混勻后37°C，200 rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分 鐘收菌，留取100 μ 1左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37°C培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37°C培養至少17h。
注意事項
1. CLBio感受態細胞建議在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化，融化后8分鐘內加入質粒,否則會影響轉化效率。
2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。
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