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細(xì)胞培養(yǎng)中的各種問(wèn)題解答
細(xì)胞培養(yǎng)中的各種問(wèn)題解答
在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中，或許你會(huì)有一系列的問(wèn)題想要問(wèn)。今天為大家整理了一些關(guān)于細(xì)胞的常見(jiàn)問(wèn)題解答。
一、細(xì)胞成長(zhǎng)曲線測(cè)守時(shí)為什么要做重復(fù)孔？
答：測(cè)定細(xì)胞成長(zhǎng)曲線細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)挑選 3 個(gè)復(fù)孔，每孔分別計(jì)三次，取其平均值，目的是減小操作差錯(cuò)。
二、為什么制作的細(xì)胞成長(zhǎng)曲線沒(méi)有到達(dá)平臺(tái)期？
答：可能有以下原因：一是細(xì)胞接種密度過(guò)低；二是細(xì)胞培育時(shí)刻過(guò)短；三是細(xì)胞成長(zhǎng)狀況欠好，使其不能正常增殖。
三、怎么挑選細(xì)胞接種數(shù)？
答：可根據(jù)細(xì)胞傳代培育過(guò)程中接種數(shù)及細(xì)胞成長(zhǎng)周期進(jìn)行核算，細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。
四、細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)為什么要用臺(tái)盼藍(lán)染色？
答：參加臺(tái)盼藍(lán)后，活細(xì)胞不上色，臺(tái)盼藍(lán)上色的細(xì)胞呈深藍(lán)色，是不健康或已死亡的細(xì)胞，不能計(jì)數(shù)。
五、測(cè)定細(xì)胞成長(zhǎng)曲線的含義是什么？
答：細(xì)胞成長(zhǎng)曲線是測(cè)定細(xì)胞肯定成長(zhǎng)數(shù)的常用辦法，也是斷定細(xì)胞生機(jī)的重要目標(biāo)，是培育細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)。由于細(xì)胞太小，無(wú)法測(cè)單個(gè)細(xì)胞的成長(zhǎng)狀況，所以測(cè)細(xì)胞集體的成長(zhǎng)曲線。
六、細(xì)胞成長(zhǎng)曲線測(cè)定周期是幾天？
答：一般是一個(gè)星期。
七、細(xì)胞成長(zhǎng)曲線還有其他辦法制作嗎？
答：當(dāng)然有。我們說(shuō)到zui多的是直接計(jì)數(shù)的辦法，除此以外還有相對(duì)計(jì)數(shù)的辦法，該類(lèi)辦法首先要制作規(guī)范曲線，標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個(gè)變量的函數(shù)，然后我們只需要測(cè)定每天這個(gè)變量的值便能夠核算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的辦法。
八、為什么細(xì)胞計(jì)數(shù)多天，細(xì)胞數(shù)沒(méi)有添加反而削減？
答：一般細(xì)胞傳代后，會(huì)有一個(gè)成長(zhǎng)緩慢的潛伏期，細(xì)胞不增殖，而細(xì)胞會(huì)有正常的死亡，故細(xì)胞數(shù)不添加反而削減。