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Biotin-HPD的小伙伴S-亞硝基化蛋白檢測(cè)試劑盒解決方案

時(shí)間:2021/6/11閱讀:522
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蛋白質(zhì)巰基亞硝基化(S-nitrosylation)是一種典型的氧化還原依賴的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,這種修飾是一個(gè)非酶的可逆的過(guò)程,主要依賴于蛋白質(zhì)與擴(kuò)散性一氧化氮的接近度。正如一氧化氮水平被激素敏感性一氧化氮合酶嚴(yán)格調(diào)節(jié)一樣,S硝基化也可以被激素調(diào)節(jié)。實(shí)際上,一氧化氮合酶刺激相互作用蛋白的S-亞硝化,依次交換S-亞硝基并將修飾轉(zhuǎn)移到靶蛋白上的選擇位點(diǎn)。在數(shù)百個(gè)實(shí)例中,S-亞硝化可以調(diào)節(jié)細(xì)胞蛋白的功能,通常通過(guò)酶活性位點(diǎn)中的功能性半胱氨酸的瞬時(shí)失活。受影響的酶類包括代謝酶,半胱氨酸蛋白酶,磷酸酶和離子通道。

S-nitrosylation.png

 

鑒于S-亞硝化在細(xì)胞調(diào)節(jié)中的廣泛作用,高效快速的S-亞硝化蛋白檢測(cè)試劑盒就非常重要。S-亞硝基化蛋白檢測(cè)試劑盒#10006518基于生物素轉(zhuǎn)換原理,將-SNO轉(zhuǎn)化為S-C-生物素,再通過(guò)檢測(cè)生物素來(lái)表征-SNO。該試劑盒使用簡(jiǎn)單方便用時(shí)短,樣品可直接用于WB檢測(cè),在Nature Cell Biology等高分雜志上有過(guò)引用。

 

當(dāng)然,它的小伙伴S-nitrosylated蛋白檢測(cè)相關(guān)試劑——如生物素標(biāo)記的探針:S-nitrosylated (SNO) proteins結(jié)合探針P NATL ACAD SCI USAMethods: A Companion to Methods in Enzymology等雜志上都有過(guò)引用。

 

Biotin-HPD是一種巰基反應(yīng)性生物素化試劑,形成可逆的二硫鍵。它用于標(biāo)記蛋白質(zhì)半胱氨酸和其他含有巰基的底物。Biotin-HPDP也用于生物素開(kāi)關(guān)技術(shù)中標(biāo)記S-亞硝基化(SNO)蛋白質(zhì),將SNO基團(tuán)還原為硫醇。標(biāo)記有生物素的化合物與鏈霉親和素偶聯(lián)珠親和地相互作用,熒光團(tuán)、酶等。Biotin-HPDP與含有巰基的底物的相互作用很容易在ph6.57.5的緩沖液(如PBS)中進(jìn)行。在抗生物素和底物之間形成的二硫鍵可以稍后被還原劑(如二硫蘇糖醇)切割。

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