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間充質干細胞有望通過治療患者酒精性肝病
閱讀：470 發布時間：2020-2-14 酒精性肝病（ALD）是范圍內發病率和死亡率高的慢性肝病的主要原因。根據近的一項回顧，中國的酒精性肝病患病率約為4.5％，令人震驚的是，它將超過美國（6.2％）和歐洲國家（6％），并且已經使鄰國日本（1.56-2.34）相形見絀。
酒精性肝病是一種復雜的疾病，涵蓋了廣泛的肝病灶，包括脂肪變性，酒精性肝炎（AH），進行性纖維化，肝硬化和肝細胞增生癌，可能會分別，同時或依次在患者中發生。酒精性肝炎是壞死性炎癥過程可能導致在40％的病例肝硬化由于其與纖維化的進展關聯，并且患者無酒精性肝炎處于發展肝硬化。
嚴重的酒精性肝炎與*的短期死亡率相關，在3個月時約20–50％，是致命的疾病之一。盡管細胞損傷，氧化應激，炎癥和細菌易位是酒精性肝病的驅動因素，并且已經進行了多次嘗試來改善患者的預后，但是對于酒精中毒和糖皮質激素暴露于重癥患者，仍然沒有比這更成功的治療方法。
間充質干細胞（MSC）是可以從許多的身體部位，如骨髓（BM）[獲得多能性細胞群]，脂肪組織，臍帶和胎盤。這些細胞易于分離，可以在培養中迅速擴增并分化為多種細胞譜系，似乎是細胞療法的理想來源。
先前的研究表明，TSG-6能夠抑制許多信號傳導途徑，例如有絲分裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）途徑和核因子（NF）-κB途徑，并且這些信號傳導途徑也已經被在酒精性肝病。
以前的研究還報告說，信號轉導和轉錄激活子3（STAT3）信號傳導途徑在ALD的發病機理，和急性酒精攝入能激活STAT3信號。然而，尚不清楚STAT3信號傳導與AH如何相關以及MSC是否可以通過TSG-6和/或與STAT3信號傳導相互作用來發揮其在AH中的功效。因此以研究以下三個問題：首先，確認MSCs對AH的療效；第二，探討TSG-6與MSCs對AH的療效的關系。第三，研究STAT3信號轉導與MSCs治療AH的相關性。
使用8-10周齡的雌性小鼠，引入兩劑以上的乙醇管飼來誘導更嚴重的酒精性肝炎（AH)。
在建模期的第3天，第6天和第11天，給AH組的小鼠灌胃單劑量的乙醇（31.5％乙醇（v / v），400μl/小鼠），而給對照組的小鼠灌胃等溫的糊精麥芽糖（45％（w / v），400μl/小鼠）。
在第10天，將有或沒有轉染的MSC腹膜內（ip）給予AH + MSC，AH + sc-MSC，AH + siTSG-6-MSC和AH + MSC + AG490組（5×10 6細胞/小鼠）；注射MSC后，向AH + MSCs + AG490組（20μg/小鼠，腹腔注射）再加一劑AG490。
直到第11天，盡管AH組的肝臟/體重比與對照組相比更高，但所有組之間均觀察到相似的體重增加。腹膜內注射MSCs（5×10 6個細胞/小鼠）可顯著改善肝臟損傷參數，例如肝臟/體重比。
在對照組中，除肝細胞膨脹外，沒有發現明顯的肝損傷跡象（ i，n）。與這些數據一致，我們觀察到腹膜內注射MSCs（5×10 6個細胞/小鼠）顯著抑制了全身和肝臟的炎癥反應，這反映在促炎細胞因子（即白介素（IL）-6，TNF-α，環-加氧酶（Cox）-2）與AH組相比，AH + MSC組的抗炎細胞因子（即IL-10，TSG-6）升高。
接下來研究了MSC在AH中發揮治療作用的機制。由于大量的研究報告，通過分泌作用，干細胞TSG-6在其他疾病模型，試圖調查是否間充質干也由TSG的策略，通過分泌TSG-6工作-6擊倒并模仿。
與未經治療的AH小鼠相比，腹腔注射5×10 6個細胞/小鼠可顯著降低肝/體重比，肝酶以及血液和肝脂質。但是，腹膜內注射5×10 6 siTSG-6-MSCs /小鼠后，這些作用明顯減弱，但是腹膜內注射5×10 6 sc-MSCs /小鼠后這些作用并未受到影響。同時，ipTSG-6（10μg/小鼠）的腹膜內注射顯示出與MSC或sc-MSC注射相當的效果。氧化應激是ALD的已知驅動因素。
研究人員觀察到與未治療的小鼠相比，腹腔注射5×10 6個 MSC /小鼠顯著降低了肝MDA，但增加了GSH的肝儲備，而注射siTSG-6-MSC卻顯著否定了sc-MSC，這與未治療的小鼠明顯相反rmTSG-6的給藥模擬了MSC或sc-MSC的作用。
類似地，5×10周的腹膜內注射6的MSC /小鼠顯著緩解了肝脂肪變性，肝細胞氣球，壞死性炎癥和相應的組織學分數。
根據這些發現，siTSG-6-MSC而非sc-MSC顯著降低了IL-6，TNF-α和Cox 2的水平（a –h）并增強了IL-10和TSG-6（a –h）。 5i–n）小鼠血液和肝臟發炎的水平。rmTSG-6的外源給藥產生的結果與MSC和sc-MSC相似，但與siTSG6-MSC無關。間充質干細胞通過分泌TSG-6抑制STAT3信號傳導減少乙醇誘發的肝損傷
探討可能的作用機制在小鼠MSCs的影響底層啊，評估了STAT3信號，因為STAT3據報道，ALD發揮顯著作用。研究人員觀察到STAT3信號傳導的AH組顯著激活相比于正常對照組，通過增加的磷酸化STAT3（P-STAT3）的水平所反映，盡管STAT3水平沒有改變。 腹膜內給予MSC或sc-MSC但未給予siTSG-6-MSC（5×10 6個細胞/小鼠）后，p-STATs水平顯著降低，但與未治療的小鼠相比，STAT3水平沒有變化。
此外，rmTSG-6的腹膜內注射產生磷酸化STAT3的類似抑制到MSC或SC-MSC的，而STAT3不受影響所示。
有趣的是，與單獨給予MSC相比，腹膜內注入AG490（一種STAT3信號抑制劑）和MSC可以進一步抑制p-STAT3，但不能抑制STAT3水平，這也導致AH的改善更為明顯。所有這些數據均支持MSC通過TSG-6發揮作用，進而可能抑制STAT3信號傳導。