1.產品名稱：小鼠食管上皮細胞
2.組織來源：食管組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
小鼠食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統發生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障，防止食管內容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。
本公司生產的采用機械分離法結合組織貼塊法，并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基（產品貨號：CM-M027）作為體外培養的培養基。

三、使用方法
在技術部標準操作流程下，小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代；建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和
技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時
和我們，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考