詳細介紹
1.產品名稱:小鼠膀胱平滑肌細胞
2.組織來源:膀胱組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠膀胱平滑肌細胞分離自膀胱組織;膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官,膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關,包括膀胱功能障礙。研究表明,組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖,膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質的分泌表型可通過細胞所經歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑,因此,了解在疾病發生及持續過程中平滑肌怎樣變化,這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成,由內而外為黏膜層、肌層和外膜。其中,肌層主要由平滑肌構成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。體外培養膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段,也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。
本公司生產的采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基(產品貨號:CM-M059)作為體外培養的培養基。
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和
技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時
和我們,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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