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人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要

閱讀:168          發布時間:2020-5-14

人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要:

1.實驗前標準品、試劑及樣本的準備;

2.加樣(標準品及樣本)50μL,37℃孵育30分鐘;

3.洗板5次,加酶標試劑50ul,37℃孵育半小時;

4.洗板5次;加入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘

5.加終止液50μL,立即450nm讀數。

6.計算

結果判斷:

1.每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設置復孔,則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標,標準品的濃度為縱坐標,繪出標準曲線。

2.推薦使用專業的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數;亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

3.若樣品OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。

 

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