T/GHA-VSMC  細胞專用培養基通常使用DMEM培養基，添加10% - 15%胎牛血清、1%雙抗，以及維生素C、肝素等成分。維生素C有助于維持細胞的正常代謝和膠原蛋白的合成，肝素可以抑制細胞的過度增殖，使T/GHA - VSMC細胞（人血管平滑肌細胞）保持良好的生長狀態和功能。

T/GHA-VSMC  細胞專用培養基

T/G HA-VSMC 細胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持T/G HA-VSMC 細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含T/G HA-VSMC 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于T/G HA-VSMC 細胞的培養。

產品主要成分：

F12K基礎培養基               85.65%

優質胎牛血清               10%

ITS（胰島素+轉鐵蛋白+硒）           1%

P/S             1%

內皮細胞生長添加劑           0.1%（0.03 mg/ml）

抗壞血酸              0.25%（0.05mg/ml）

HEPES                   1%（10 mM）

TES                  1%（10 mM）

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，保存2個月；

1）復蘇T/GHA-VSMC  細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查T/GHA-VSMC  細胞密度。

2）細胞傳代：如果T/GHA-VSMC  細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。      

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗T/GHA-VSMC  細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若T/GHA-VSMC  細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待T/GHA-VSMC  細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

1.使用T/GHA-VSMC  細胞時應注意無菌操作，避免污染。

2.本產品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3.為保持本T/GHA-VSMC  細胞的優良使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。

4.所有產品請于保質期內使用，超出保質期，必須放棄使用。

5.本產品只供進一步科研使用，不可應用于臨床等其他方面。

6.培養基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響T/GHA-VSMC  細胞正常使用。