詳細介紹
小鼠原代NK細胞專用培養基
小鼠原代NK細胞培養基由()團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠原代NK細胞最佳的生長狀態。
本產品中已包含小鼠原代NK細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代NK細胞的培養。
產品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代NK細胞基礎培養基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代NK細胞培養添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇小鼠原代NK細胞培養基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代NK細胞培養基密度。
2)細胞傳代:如果小鼠原代NK細胞培養基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗小鼠原代NK細胞培養基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若小鼠原代NK細胞培養基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待小鼠原代NK細胞培養基生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用小鼠原代NK細胞培養基時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代NK細胞培養基的優良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。
4.所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5.本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代NK細胞培養基正常使用。
PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 轉錄因子LBX1抗體 |
Rhesus antibody Rh human Fibrinogen Monoclonal 單克隆抗體 規格 0.2ml | 酸化分化相關基因NDRG1抗體 |
Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1246) /FITC 熒光素標記0酸化谷受體2A抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | E3 ELISA Kit 大鼠雌三醇Multi-class antibodies規格: 48T |
Rhesus antibody Rh Phospho-p56Dok2(Tyr351) 0酸化D酪激酶衰減蛋白2抗體 規格 0.1ml | Anti-LFABP/FABP-1 /FITC 熒光素標記肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
VCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞粘附分子1Multi-class antibodies規格: 48T | phospho-CDKN2A (Ser140): 0酸化抑癌基因p16抗體 0.1ml |
成纖維細胞生長因子受體底物2抗體 | CM-H108人表皮黑色素細胞培養基100mL |
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系 小鼠胚胎成纖維細胞,3T6細胞 ES-2(人卵巢透明細胞癌細胞) | HPAC細胞,人胰腺癌細胞 人支氣管上皮細胞,16HBE細胞 皮膚肥大細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
phospho-Fos B (Ser27): 0酸化癌基因FOS蛋白B抗體 0.1ml | SEMA4D Others Human 人 SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4Multi-class antibodies規格: 48T | RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1 | HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 Rattus |
腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體 | 心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml) |
酸化原癌基因c-kit抗體 | 小鼠原代NK細胞專用培養基P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD4 Others Ferret 雪貂 CD4 / Leu-3 人細胞裂解液 (陽性對照) | PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人非色素睫狀上皮細胞 (HNPCEpiC)( 5×105 ) LX-2, 人肝星形細胞株 Human | EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao |