大鼠視網膜神經節原代細胞

大鼠視網膜節細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節細胞層、纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視乳頭。視網膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的纖維跨越視網膜表面，經由視到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。視網膜節細胞貼壁后呈單層排列，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對透明，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞，在體外屬于不增殖群。視網膜節細胞是青光眼病理性損害的主要細胞，視網膜節細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷，研究視網膜節細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發病機制的研究。

產品名稱：大鼠視網膜神經節細胞

組織來源：視網膜組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠視網膜節采用-膠原酶聯合消化法，結合視網膜節細胞專用培養基培養和化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠視網膜節經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

大鼠重肽絲蛋白(NEFH)試劑盒 ，英文名： NEFH ELISA Kit

Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗粒細胞核周抗體(pANCA)試劑盒

MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰島素受體β

微型RNA(miRNA)擴增試劑盒20次

ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬細胞性蛋白3β

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒規格：96T/48T

小鼠CD3分子試劑盒   小鼠CD3分子試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠CD3分子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠CD3分子試劑盒、小鼠CD3分子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠β-防御素試劑盒   小鼠β-防御素試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠β-防御素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠β-防御素試劑盒、小鼠β-防御素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠肝病毒試劑盒   小鼠肝病毒試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠肝病毒試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠肝病毒試劑盒、小鼠肝病毒試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豬流感病毒A試劑盒   豬流感病毒A試劑盒   規格型號：96T/48T   豬流感病毒A試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬流感病毒A試劑盒、豬流感病毒A 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

PDGFRA重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein

CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mgCYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)

CCL21重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein

CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽)

SERPINA11 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA11 蛋白

CTLL-2細胞，T細胞 人胰腺癌細胞,JF-305細胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細胞FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液   RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 小鼠原代破骨細胞 兔原代牙髓干細胞

大鼠視網膜神經節原代細胞chloramphenicol/BSA 偶聯牛血清白蛋白 2mgchloramphenicol/BSA 偶聯牛血清白蛋白

CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白

TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標簽) Protein

SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 標簽)

PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein