詳細介紹
人腹膜間皮原代細胞
人腹膜間皮細胞分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞構成,藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和組織經由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復雜的漿膜,由皮及少量結締組織構成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續、移行,共同圍成不規則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構成間皮的細胞,正常大小約為15-25微米,細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑,使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護,不會互相磨損受傷。而間皮所生產的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質來達成,分泌物多半為細胞外基質、玻尿酸類物質。
英文名稱 | Human Peritoneal Mesothelial Cells | 組織來源 | 腹膜組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7545 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:人腹膜間皮細胞
組織來源:腹膜組織
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人腹膜間皮經PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
原代心肌細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml | Phospho-NPM (Thr199): 0酸化核仁0酸蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MEGF5/Slit3 復合型表皮生長因子樣結構域蛋白5抗體 規格 0.2ml | Anti-TRADD/FITC 熒光素標記有死亡區的壞死因子受體1相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain) 有死亡區的壞死因子受體1相關蛋白抗原 0.5mg | Anti-NTCP 離子/磺膽酸共轉運蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml |
Anti-FOXF1/FITC 熒光素標記叉頭蛋白F1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLPI/ALK1 分泌型白細胞蛋白酶抑制因子抗體 規格 0.2ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)/FITC 熒光素標記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | anti-AQP1/FITC 熒光素標記水通道蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
BPI Others Human 人 BPI 人細胞裂解液 (陽性對照) | ANPEP Others Mouse 小鼠 ANPEP / APN / CD13 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1 | LY86 Others Human 人 LY86 / MD-16 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細胞裂解液 (陽性對照) | AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
LA795(小鼠肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 V79-4(中國倉鼠肺細胞) | DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
草魚腎細胞;GIK | 人腹膜間皮原代細胞Anti-NTCP 離子/磺膽酸共轉運蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml |
NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 小鼠子細胞;U14 |
腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | IL35 Others Human 人 IL-35 (IL12A & IL27B) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
TMNE細胞,化學轉化小鼠鼻咽上皮細胞 C6(腦膠質瘤細胞) 牛腎細胞;MDBK | GPAT4: 甘油酰基轉移酶4抗體 0.2ml |
Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 人11去氫血栓烷B2Multi-class antibodies規格: 48T | TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗體 Anti-TRAIL/Apo2L 0.1ml | PGI(Human prostacycline) ELISA Kit 人前列環素 96T |
phospho-ATM (Tyr170): 0酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體 0.1ml | BPI Others Human 人 BPI 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。