化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人肝癌組織源經檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人肝癌組織源原代細胞 | 組織來源 | 肝癌組織 |
英文名稱 | Human Hepatoma Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X7438 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人肝癌組織源細胞分離自患有肝癌病人的肝癌組織；肝癌即肝臟惡性腫瘤，可分為原發性和繼發性兩大類。原發性肝臟惡性腫瘤起源于肝臟的上皮或間葉組織，前者稱為原發性肝癌，是我國高發的，危害極大的惡性腫瘤；后者稱為肉瘤，與原發性肝癌相比較較為少見。繼發性或稱轉移性肝癌系指全身多個器官起源的惡性腫瘤侵犯至肝臟。一般多見于胃、膽道、胰腺、結直腸、卵巢、子宮、肺、乳腺等器官惡性腫瘤的肝轉移。原發性肝癌的病因及確切分子機制尚不清楚，目前認為其發病是多因素、多步驟的復雜過程，受環境和飲食雙重因素影響。流行病學及實驗研究資料表明，乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染、黃曲、飲水污染、酒精、肝硬化、性激素、亞硝胺類物質、微量元素等都與肝癌發病相關。繼發性肝癌（轉移性肝癌）可通過不同途徑，如隨血液、淋巴液轉移或直接侵潤肝臟而形成疾病。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
原代系膜細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝：500/100ml | Anti-Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 0酸化酪激酶A抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml |
NNE(Human non-neuronal enolase) ELISA Kit 人非元性烯醇化酶 96T | Anti-MK(Midkine) 熒光素標記中期因子/肝素結合生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TLR5 Toll樣受體5抗體 規格 0.1ml | HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 人組織蛋白去乙酰化酶Multi-class antibodies規格： 48T |
HSD11B1： 羥基類固醇脫氫酶11β1抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC134 卷曲螺旋結構域蛋白134抗體 規格 0.2ml |
FBXO4： FBXO4蛋白抗體 0.2ml | Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1Multi-class antibodies規格： 48T |
VEGFA Others Human 人 VEGF 183 / VEGF-A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | HMy2.CIR(人B淋巴母細胞) 5×106cells/瓶×2 mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS4 |
人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1 | CSF1R Others Rat 大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人細胞裂解液 (陽性對照) | Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein (ECD 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CTLL-2(小鼠T細胞) 5×106cells/瓶×2 人結膜成纖維細胞HConF | SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 V79(中國倉鼠肺細胞) |
草魚肝臟細胞;L8824 | 人肝癌組織源原代細胞HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 人組織蛋白去乙酰化酶Multi-class antibodies規格： 48T |
CCL5 Others Human 人 CCL5 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H126人小腦顆粒細胞培養基100mL |
NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 | 293001A細胞，Sars蛋白表達株 人癌細胞,MDA-MB-436細胞 雪旺細胞培養基SCM-prf |
CD52 Others Rat 大鼠 CD52 / CDW52 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PRMT1/FITC 熒光素標記蛋白質精甲基轉移酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Optimedin： 嗅球蛋白3抗體 0.2ml | T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPRR1a： 角質蛋白α抗體 0.1ml | Collagen XI alpha 2： 膠原蛋白11A2抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗兔IgG 規格 0.1ml | VEGFA Others Human 人 VEGF 183 / VEGF-A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網