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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈內皮采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠冠狀動脈內皮原代細胞 | 組織來源 | 冠狀動脈 |
英文名稱 | Mouse Coronary Artery Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7290 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠冠狀動脈內皮細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優勢型、均衡型、左優勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干，發自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內皮細胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細胞，它形成冠狀動脈的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內皮細胞是沿著整個循環系統，由心臟直至小的微血管。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
食管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 白介素8抗體 |
蛋白酶體PSMα5抗體 | 癌胚抗原相關細胞粘附分子3抗體 |
酸化范可尼貧血組蛋白A抗體 | 肌肉特異性環指蛋白3抗體 |
7號染色體開放閱讀框46抗體 | 鴨瘟病毒DPV抗體 |
1號染色體開放閱讀框141抗體 | 組胺受體H1抗體 |
DYRK3 Others Human 人 DYRK3 / REDK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人癌細胞;MDA-MB-231 | TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照) |
hMNC-PB single donor Pellet 人類外周血單核細胞團塊單一捐獻者，超 > 1 mio.cells 人羊膜上皮細胞總RNAHAmEpiC NA | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HA(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 內皮細胞培養基ECM | HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM-3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-M042小鼠直腸平滑肌細胞培養基100mL | 小鼠冠狀動脈內皮原代細胞肌肉特異性環指蛋白3抗體 |
TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772 ) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓 |
人表皮黑色素細胞-淺色素RNAHEM-l miRNA5 μg | hPC-PL Pellet 人胎盤周細胞團塊 > 1 mio.cells 人前列腺平滑肌細胞總RNAHPSMC NA |
Saos-2細胞，骨肉瘤細胞 人細胞,Hela P10s-11F細胞 人腦微血管內皮細胞總RNAHBMEC NA | 心動加速蛋白多肽抗體 |
L3MBTL3蛋白抗體 | 人骨髓間充質干細胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105) |
蛋白酪激酶ATK抗體 | NDST1蛋白抗體 |
G蛋白調節誘導突增生蛋白1抗體 | DYRK3 Others Human 人 DYRK3 / REDK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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