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大鼠ELISA試劑盒操作步驟：

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品大鼠ELISA試劑盒孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 待測樣本孔先加生物素10μL，再加待測樣本50μL；

4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5 次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min 內，在450nm 波長處測定各孔的OD 值。

大鼠ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法：

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本大鼠ELISA試劑盒收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。