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技術文章

人elisa試劑盒樣品收集使用方法

閱讀:243          發布時間:2021-3-30

人elisa試劑盒樣品收集:

1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。

2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。

3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。

5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。

7. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。

8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
 

人elisa試劑盒性能:

1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2.靈敏度:低檢測濃度小于10 pg/ml。

3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

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