詳細介紹
Matrigel 基底膜基質,無酚紅,Matrigel基質會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環境下進行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
推薦包被與成膠方法:
注意:為了保證Matrigel基質膜的成膠性能與穩定性,稀釋濃度不應低于1:3,可用無血清培養基稀釋,Matrigel成膠后立即使用。
薄膠成膠方法:
1.凍融后,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
2.將需要使用的培養板置于冰上,加入濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigel基質。
3.在37℃放置30分鐘,即可使用。
厚膠成膠方法:
1.凍融后,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
2.將需要使用的培養板置于冰浴,將培養的細胞與Matrigel基質混合,用移液槍頭使其懸浮于基質中。加入濃度為150-200μL/cm2生長面積的Matrigel基質。
3.在37℃放置30分鐘,可成膠。可以加入細胞培養的基質,也可使細胞直接生長在膠表面。
薄層包被方法:
1.凍融后,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
2.根據使用需要,采用無血清培養基稀釋Matrigel基質。根據實驗需要確定最佳包被濃度。
3.將稀釋的Matrigel基質包被于所需的培養器皿中,包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時。
4.去除未結合的Matrigel,用無血清培養基輕輕地沖洗。
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