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革蘭氏染色試劑盒
  • 革蘭氏染色試劑盒
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更新時間:2025-06-27 23:57:22

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產品概述 product description 通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙,因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出,因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
保存溫度
室溫密封
注意事項
1.有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。
2.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
顯微鏡
適用樣本
細菌
產品特點
貝博快速可縮短染色時間,通常經過初染—媒染—脫色—復染四步,整個染色過程只需5分鐘,不容易造成假陽性和假陰性,能夠準確鑒別革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌,具有操作簡便、方法可靠,試劑性質穩(wěn)定、保質期長,結果易于觀察等特點。

儀器準備
1. 玻片
2. 染缸
3. 滴管
4. 光學顯微鏡
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1、 標本涂片不能太厚。較厚的涂片應延長脫色時間。
2、 固定時通過火焰的溫度不能太高。
3、 脫色劑脫色是革蘭氏染色的重要步驟,如脫色過度則陽性菌誤染成陰性菌,如脫色不夠,則陰性菌誤染成陽性菌,脫色時間要掌握好。
4、 在實驗中如果出現(xiàn)假陽性和假陰性的結果,假陽性主要是由于脫色不,可能是由于涂片過厚,或者是結晶紫染色過度,導致脫色不。假陰性可能是因為細胞固定過度,造成細胞壁通透性的改變,而出現(xiàn)假陰性結果;另外,細胞培養(yǎng)時間太長,可能已經有部分細胞發(fā)生死亡或者自溶,也導致細胞壁通透性的改變而出現(xiàn)假陰性結果。
使用方法
1、涂片:
  液體培養(yǎng)基:左手持菌液試管,在酒精燈火焰附近5cm左右打開管蓋;右手持接種環(huán)在火焰中燒灼滅菌,等冷卻后從試管中沾取菌液一環(huán),在潔凈無脂的載玻片上涂直徑2mm左右的涂膜,最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。
固體培養(yǎng)基:先在載玻片上滴一滴無菌水,再用接種環(huán)取少量菌體,涂在載玻片上,使其薄而均勻。
2、 晾干:讓涂片在空氣中自然干燥。
  3、 固定:讓菌膜朝上,通過火焰2-3次固定(以不燙手為宜)。
  4、 染色:將固定過的涂片放報紙上,滴加初染液,染1min。
  5、 水洗:用水緩慢沖洗涂片上的染色液,用吸水紙吸干。簡單染色結束可觀察細胞形態(tài)。
  6、 媒染:滴加1滴媒染液,染1min,水洗。
  7、 脫色:吸去殘留水,滴加脫色液脫色20-30s,將玻片不停搖動,至流出液無紫色,立即水洗。
8、 復染:滴加復染液復染3-5min,水洗。
9、 結果觀察。

結果分析:
革蘭氏陽性菌都呈紫色,革蘭氏陰性菌都呈紅色

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