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TRIzol RNA提取操作步驟

2023-4-20 閱讀(369)

1.樣品處理:
培養細胞:收獲細胞1-5×107,轉移1.5ml離心管在其中,加入1ml Trizol,混合均勻,在室溫下靜置5分鐘。
組織:取50-100mg組織(新鮮或-70℃,組織保存在液氮中)置于1.5ml離心管中,加1ml Trizol充分勻漿,在室溫下靜置5min。
2.加入0.2ml
CHCl3,振搖15s,靜置2min。

3.4℃離心12000g×15min,取上清液。
4.加入0.5ml異丙醇,將試管中的液體輕輕混合,然后在室溫下靜置10分鐘。
5.4℃離心12000g×10min,棄去上清液。
6.加入1ml的75%乙醇,輕輕洗滌沉淀。 4℃7500g×5min,棄去上清液。
7.干燥,加入適量的DEPC H2O溶解(65℃10-15分鐘)。




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